Genistein对小鼠哮喘症状及细胞因子的影响[基金项目

发表时间:2018-06-01 ? 来源:《系统医学》2018年5期 ? 作者:李惠
[导读]:Genistein可降低哮喘小鼠BALF中的IL-4、IL-5的含量。
深圳市龙岗区人民医院,广东深圳,518172

【摘要】目的:探讨Genistein对哮喘小鼠BALF中IL-4、IL-5的影响。方法:32只BALB/c小鼠随机分为三组:哮喘模型组(A组)、Genistein干预组(B组)和对照组(C组)。采用卵蛋白(OVA)、氢氧化铝联合雾化吸人的方法建立慢性哮喘小鼠模型。B组并于激发前腹腔Genistein。检测BALF中IL-4、IL-5的含量。结果:A组BALF中IL-4、IL-5的含量明显增加(P<0.01);B组BALF中IL-4、IL-5的含量均较A组明显降低(P<0.01)?结论:Genistein可降低哮喘小鼠BALF中的IL-4、IL-5的含量。
【关键词】Genistein;哮喘;IL-4;IL-5
支气管哮喘简称哮喘,是由多种炎症细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病[1]。近些年随着大气环境、饮食结构、社会环境等因素的改变,哮喘发病率呈逐年上升趋势。细胞因子IL-4、IL-5作为哮喘气道炎症的重要参与因子成为研究热点[2]。临床研究表明,Genistein能够改善哮喘症状.减轻气道炎症细胞聚集.但其具体作用机制尚未完全清楚。本研究通过观察Genistein干预哮喘模型小鼠后,观察其IL-4、IL-5水平的变化,初步探讨Genistein对哮喘的作用及机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物????Balb/c小鼠,共32只,以小鼠专用饲料及饮用水喂养。按照随机数字表法随机分为模型组(A组,11只)、Genistein组(B组,11只)、对照组(C组,10只)3组。
1.2??药物与试剂??Genistein(国产)。卵清蛋白(OVA,V级):由美国Sigma公司生产。IL-4、IL-5的ELISA试剂盒。
1.3?仪器??超声雾化吸入器,玻璃雾化箱,低温高速离心机,电热恒温干燥箱。
1.4?造模及药物干预??利用OVA被动致敏并激发的方法建立哮喘小鼠模型。A、B组分别在实验第1日和实验第15日经腹腔注射0.2 mL致敏混悬液致敏.C组经腹腔注射等量0.9%氯化钠注射液。第22日起,A、B组小鼠放于玻璃雾化箱中给予5.0%OVA混悬液雾化激发,每次约30 min,共14天。C组给予等量0.9%氯化钠注射液雾化。B组在每次雾化前给予?30mg/kg的Genistein腹腔注射。
1.5 支气管肺泡灌洗液(BALF)收集与指标检测??各组小鼠最后一次雾化后24h内,处死小鼠,打开胸腔,在右主支气管处结扎右肺,以冰磷酸盐缓冲盐水(PBS)灌洗右肺,反复共3次,每次入量为0.3 mL,灌洗时可适当按摩胸部,以便灌洗充分。每只小鼠BALF回收率大于80%为合格标本。BALF中的上清液用ELISA法检测IL-4、IL-5水平,操作方法严格按照ELISA试剂盒说明书。
1.6?统计学分析 ?用SPSS13.0统计软件进行分析,计量资料用(x(__)±s)表示,多组样本比较采用单因素方差分析,各组间两两比较用SNK-Q检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 ?结果
2.1?肺泡灌洗液中IL-4IL-5的水平??A组和B组IL-4、IL-5的水平均较C组高(P<0.01);B组IL-4、IL-5的水平均较A组降低 (P<0.01)。见表1。
表1 各组BALF中IL-4、IL-5的水平(x(__)±s,pg/ml)
组别 n IL-5? IL-5?
C组 10 2.27±0.77 3.10±0.26
A组 11 14.54±4.49aa 15.42±4.23aa
B组 11 7.85±5.04aabb 8.70±3.65aabb
注:与对照组比较,aaP<0.01;与模型组比,bbP<0.01
3 讨论
哮喘是一种气道慢性炎症,通常伴有气道高反应性、组织损失和再修复为特点的疾病。一般来说,哮喘分为Th2 相关性哮喘和非Th2相关性哮喘,其中Th2 相关性哮喘包含早发型过敏性哮喘、迟发型嗜酸粒细胞型哮喘,非Th2 相关性哮喘包含运动相关性哮喘、中性粒细胞性哮喘、粒细胞缺乏型哮喘。经研究发现,哮喘患者体内CD4+ T 细胞数目增加,CD4+ T细胞诱导产生的IL-4和IL-5增多,且肺泡灌洗液、黏膜活检、血液中嗜酸粒细胞数目增加[3]。因此,嗜酸粒细胞炎性反应是引起体内病理生理变化和气道重构的主要诱因。??
????IL-4诱导IgE同型转换、T细胞向Th2 细胞分裂,Th2细胞随后产生IL-4、IL-5和IL-13。它还参与促进Th2细胞的迁移和嗜酸粒细胞迁移到发炎组织。IL-5是嗜酸粒细胞的分化和生存的关键的细胞因子。IL-5受体有α-和β-亚基,IL-5Rα负责绑定IL-5 的结合位点,IL-5Rβ负责信号。嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、B细胞表达IL-5Rα。嗜酸粒细胞由IL-5 产生的嗜酸细胞活化趋化因子驱动到肺组织[4]
Genistein是一种异黄酮类的植物雌激素,增加抗氧化酶的活性、抑制热休克蛋白、诱导细胞分化、促进细胞凋亡、抑制细胞代谢关键酶活性、阻止某些因子的作用,减轻过敏性炎症反应。本研究发现, A组和B组IL-4、IL-5的水平均较C组高(P<0.01);B组IL-4、IL-5的水平均较A组降低 (P<0.01)。验证了哮喘发作时Th2型细胞因子的产生是增多的,提示其可能参与了哮喘病的发展,而Genistein可抑制Th2型细胞因子的产生。
综上所述,Genistein可缓解小鼠哮喘症状,可能与其降低哮喘小鼠IL-4 和IL-5 水平有关。
参考文献
[1]中华医学会呼吸病学分会哮喘学组.支气管哮喘防治指南(2016年版) [J].中华结核和呼吸杂志,2016,39(9):675-697.
[2]陈旭央,张冰,胡莉蔓.IL-17、IL-5、IL-4、IL-33等细胞因子在哮喘发病机制中的作用[J].中国医药导报,2015,12(14):98-101.
[3]王惠庭,管敏昌,汤卫红,等.咳嗽变异性哮喘肺泡灌洗液IL-5变化及孟鲁司特对其调节作用[J].中国卫生检验杂志,2013,23(14):2901-2904.
[4]MASELLI DJ,VELEZ MI,ROGERS L.Reslizumab in?the management of poorly controlled asthma: the data so?far [J].J Asthma Allergy,2016(9):155-162.
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